Chicken recombinant antibodies against infectious bursal disease virus are able to form antibody–virus immune complex

Abstract

Virus particles exposed to specific anti-virus antibodies result in the formation of immune complexes (Icx). Recent vaccination strategies have employed this feature, and an infectious bursal disease virus (IBDV) vaccine based on Icx has been released and is expected to replace conventional IBDV vaccines. We evaluated whether chicken recombinant antibodies (rAb) specific for IBDV, rather than conventional chicken anti-IBDV sera, could be used to generate Icx. Out of 14 rAb expressed as soluble single-chain variable fragments (scFv), nine were able to completely neutralize Bursavac, a live IBDV vaccine, when tested in ovo. When these rAb were mixed with IBDV and inoculated into either 18-day-old embryos, or 1-day-old or 2-week-old specific pathogen free chicks, a rAb.IBDV complex was formed. These Icx were similar to those produced by polyclonal chick anti-IBDV sera and IBDV. Following inoculation of the rAb.IBDV complex, the virus was rendered non-infectious for 5 to 7 days. After this time virus was released from the Icx, resulting in infection of the inoculated chicks and subsequent induction of an immune response and protection against virulent IBDV challenge. The results indicated that genetically derived antibodies can replace polyclonal sera in the formulation of Icx vaccines. Les anticorps recombinants de poulet contre le virus de la bursite infectieuse aviaire sont capables de former des complexes immuns anticorps-virus Les particules virales mises au contact des anticorps anti-virus spécifiques entraînent la formation de complexes immuns (Icx). Des stratégies récentes de vaccination ont employé cette caractéristique et un vaccin contre le virus de la bursite infectieuse aviaire (IBDV) basé sur un Icx a été mis au point et est supposé remplacer les vaccins conventionnels de l'IBDV. Nous avons évalué si des anticorps recombinants de poulet (rAb) spécifiques de l'IBDV, plutôt que des sérums de poulets conventionnels, anti-IBDV, pouvaient être utilisés pour former les Icx. Parmi les quatorze rAb exprimés sous la forme soluble de fragments variables de chaîne simple (scFv), neuf ont été capables de neutraliser complètement le Bv, un vaccin vivant de l'IBDV, lors de test in ovo. Quand ces rAb ont été mélangés à l'IBDV et inoculés soit à des embryons âgés de 18 jours, soit à des poussins exempts de microorganismes pathogènes spécifiés âgés d'un jour ou de deux semaines, un complexe rAb.IBDV s'est formé. Ces Icx étaient similaires à ceux produits par les sérums polyclonaux de poussin, anti IBDV, et l'IBDV. Après l'inoculation du complexe rAb.IBDV, le virus est devenu non infectieux pendant 5 à 7 jours. Après ce temps le virus a été libéré de l'Icx, entraînant une infection des poussins inoculés et induisant ultérieurement une réponse immunitaire et une protection vis-à-vis d'une épreuve avec une souche virulente d'IBDV. Les résultats ont montré que ces rAb dérivés génétiquement peuvent remplacer les sérums polyclonaux dans la formulation des vaccins Icx. Rekombinante Hühnerantikörper gegen das Virus der infektiösen Bursitis können Antikörper-Virus-Immunkomplexe bilden Das Zusammenbringen von Viruspartikeln mit spezifischen anti-Virus-Antikörpern führt zur Bildung von Immunkomplexen (Icx). Neuere Vakzinationsstrategien verwenden diese Eigenschaft und eine auf Icx basierende Vakzine gegen infektiöses Bursitisvirus (IBDV) wurde zugelassen, von der erwartet wird, die konventionellen Vakzinen zu ersetzen. Wir untersuchten, ob Hühner rekombinante Antikörper (rAB), die spezifisch gegen IBDV gerichtet waren, besser zur Bildung von Icx nutzen können als konventionelle Hühner-IBDV-Antiseren. Von vierzehn als lösliche variable Einzelkettenfragmente exprimierten Abs (scFv) waren neun in der Lage, Bv, eine IBDV-Lebendvakzine, bei der in-ovo-Testung vollständig zu neutralisieren. Wurden diese rAbs mit IBDV vermischt und entweder in 18tägige Embryonen, eintägige oder zweiwöchige spezifiziert pathogenfreie Hühnerküken inokuliert wurden, bildeten sich rAb.IBDV-Komplexe. Diese Icx waren denen ähnlich, die mit polyklonalen Hühner-IBDV-Antiseren und IBDV entstehen. Nach Inokulation der rAb.IBDV-Komplexe blieb das Virus für 5-7 Tage lang nicht infektiös. Nach dieser Zeit wurde das Virus aus dem Immunkomplexen entlassen, was zu einer Infektion der inokulierten Küken mit nachfolgender Induktion einer Immunantwort und eines Schutzes gegen Infektionen mit virulentem IBDV führte. Diese Ergebnisse zeigen, dass gentechnisch hergestellte Abs polyklonale Seren bei der Bildung von Icx-Vakzinen ersetzen können. Los anticuerpos recombinantes de pollo frente al virus de la bursitis infecciosa son capaces de crear inmunocomplejos virus-anticuerpo Partículas víricas expuestas a anticuerpos anti-virus específicos dieron lugar a la formación de inmunocomplejos (Icx). Estrategias de vacunación recientes han aprovechado esta característica y se ha obtenido una vacuna frente al virus de la bursitis infecciosa aviar (IBDV) basada en Icx, que se espera que sustituya a las vacunas convencionales frente a IBDV. Nosotros valoramos si, en lugar del suero de pollo anti-IBDV convencional, se podían utilizar anticuerpos recombinantes de pollo (rAb) específicos frente a IBDV, para producir Icx. De los catorce rAb's expresados como fragmentos variables de cadena única (scFv), nueve fueron capaces de neutralizar completamente Bv, una vacuna viva frente a IBDV, cuando se utilizaron in ovo. Cuando estos rAb se mezclaron con IBDV y se inocularon en embriones de 18 días de vida, o en pollos libres de patógenos específicos de un día o dos semanas de vida, se formó un complejo rAb.IBDV. Estos Icx eran similares a los producidos por el suero policlonal de pollo anti-IBDV y IBDV. El virus permaneció no infeccioso durante 5-7 días tras la inoculación de los complejos rAb.IBDV. Tras este periodo el virus se liberó de los Icx, causando infección en los pollos inoculados y la consiguiente inducción de la respuesta inmune y protección frente al desafío con IBDV virulento. Estos resultados indican que los Ab producidos genéticamente pueden sustituir el suero policlonal en la formulación de las vacunas Icx.