Abstract
As gramíneas, usadas comumente para reabilitação de áreas degradadas, podem formar associações em suas raízes com bactérias fixadoras de nitrogênio e, assim, contribuir para a sustentabilidade do ecossistema. Por outro lado, a diversidade microbiana exerce papel relevante na resiliência dos processos biológicos do solo, que incluem a fixação biológica de N2. O presente estudo teve como objetivo a caracterização fenotípica de 72 isolados de bactérias diazotróficas associativas Gram-negativas, oriundos de áreas sob diferentes estratégias de reabilitação, após a mineração da bauxita em Poços de Caldas (MG), por meio da inoculação de amostras de solo nos meios de cultivo NFb, Fam e JNFb. Estirpes tipo e referência de espécies de Azospirillum, Herbaspirillum e Burkholderia foram usadas para comparação, uma vez que são capazes de crescer nestes meios. O dendrograma de similaridade baseado em sete características culturais dos isolados em meio de cultivo GNA revelou grande diversidade, sendo obtidos 50 grupos a 81 % de similaridade. A tolerância a NaCl em meio de cultivo batata/sacarose/ácido málico variou de 0 a 50 g L-1, permitindo separar os isolados e estirpes tipo em cinco grupos. O diâmetro celular variou de 0,61 a 1,21 µm, e 13 isolados diferiram das estirpes tipo e referência. Os padrões de proteína total, obtidos por eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE), foram bastante diversos, possibilitando a formação de 15 grupos com similaridade a 75 %. Não houve relação entre os grupos formados pelas várias características estudadas, tampouco destes com as áreas de origem dos isolados. Os meios de cultivo Fam e JNFb detectaram, além das espécies-alvo, outras não identificadas. A alta dissimilaridade da maioria dos isolados em relação a estirpes tipo, principalmente com relação aos padrões eletroforéticos de proteína total, admite a possibilidade da presença de novas espécies entre eles.
Highlights
A fixação biológica de nitrogênio (FBN) é mediada por ampla gama de microrganismos procariotos que apresentam grande diversidade morfológica, fisiológica, genética, bioquímica e filogenética
As estirpes e os 72 isolados de bactérias diazotróficas cresceram no meio de cultivo batata semi - sólido durante três dias a 27 oC
Foram observadas diferenças fenotípicas entre os isolados com relação a todas as características culturais avaliadas
Summary
Os 72 isolados de bactérias diazotróficas estudados, oriundos de amostras de horizonte superficial de um Cambissolo distrófico, foram coletados de dez áreas da ALCOA Alumínio S/A, localizadas em Poços de Caldas (MG) (Quadro 1), e descritos detalhadamente em Melloni et al (2004). O isolamento destas bactérias foi efetuado no laboratório de Microbiologia do Solo/DCS/UFLA (Melloni et al, 2004), utilizando meios de cultura que favorecem o crescimento de diferentes diazotróficos: JNFb (Herbaspirillum spp.), NFb (Azospirillum spp.) e Fam (Azospirillum amazonense), cuja composição se encontra em Döbereiner et al (1995) e Magalhães et al (1983). Áreas e meios de cultivo de origem dos isolados de bactérias diazotróficas
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