大麻二酚(Cannabidiol)對抗體生成反應和T細胞活化與凋亡之影響

Abstract

大麻是一個被廣泛濫用的毒品，其主要成份為結構類似的大麻生物鹼（cannabinoids）。其中含量較豐富的有四氫大麻酚(Δ9-tetrahydrocannabinol；THC)，是大麻中樞活性的主要成份；另一成分大麻二酚(cannabidiol；CBD)則是不具中樞活性的主要成份。許多文獻均指出大麻具有明顯的免疫調節作用，影響包括in vivo 及in vitro的各種免疫反應。其中THC的作用已有大量的文獻報告。近年來CBD的研究逐漸受到重視，相關研究指出CBD具有許多藥理活性，包括抗痙攣、抗氧化、抗發炎、保護神經、改善關節炎的症狀以及抗化療的嘔吐等，顯示CBD是大麻生物鹼中一個頗具應用潛力的大麻天然成分。然而，CBD是否對免疫系統具有免疫毒性，文獻報告稀少。因此，本論文主旨在探討CBD對動物體抗體生成反應之免疫毒理學研究。 在本論文中，以卵蛋白(Ova)專一性抗體的生成反應，來觀察CBD對動物整體性的免疫調節作用。結果顯示，小鼠給予單一劑量的CBD對Ova專一性抗體生成反應呈現劑量相關性的抑制作用，在低劑量CBD（5 mg/kg）即有顯著的抑制效果。連續五天，每天一次個別給予腹腔注射CBD（5或20 mg/kg），結果也發現多重高劑量的CBD（20 mg/kg）具有顯著抑制Ova專一性抗體生成反應的作用。分析CBD抑制抗體生成反應的可能作用機制，結果顯示不論是in vivo或是in vitro投與CBD，皆對脾臟細胞分泌IL-2、IL-4和IFN-γ以及細胞的增生和代謝活性具一致性的抑制作用。但以ribonuclease protection assay (RPA)或RT-PCR分析細胞激素mRNA的表現，則沒有觀察到任何影響。顯示細胞激素的受抑制可能不是直接經由干擾細胞激素基因的表現。進一步探討CBD是否誘發脾臟細胞的凋亡反應，發現脾臟細胞以CBD處理6小時，代表凋亡後期的annexin V及propidium iodide陽性族群的細胞比率明顯上升，且CBD誘發脾臟細胞發生凋亡的作用呈現濃度相關性和時間相關性，接受CBD處理的細胞也出現凋亡反應典型的DNA laddering現象。進一步以RPA分析bcl family 調節細胞凋亡因子mRNA在脾臟細胞的表現情形，結果顯示CBD增加bak和bax等促進凋亡因子mRNA的表現。 綜合本論文的實驗結果，CBD的可能作用機制是經由促進bak和bax的表現而誘發脾臟細胞發生凋亡，導致脾臟細胞活性的下降，造成IL-2、IL-4和IFN-γ等細胞激素分泌的減少，進而導致抗體生成反應受到抑制。本論文的研究結果顯示不具中樞活性的CBD對動物體的抗原專一性抗體生成反應和T細胞活性具有顯著的免疫毒性作用。