Brain derived neurotrophic factor enhances the role of mesenchymal stem cells in inhibiting follicular helper T cells

Abstract

目的探讨脑源性神经营养因子（BDNF）增强间充质干细胞（MSC）抑制滤泡辅助性T细胞（Tfh细胞）的作用及机制。方法ELISA法检测MSC培养上清中吲哚胺2,3-二加氧酶（IDO）、IL-10、TGF-β和IL-21的含量；采集健康志愿者的外周血标本，采用人淋巴细胞分离液分离外周血中的淋巴细胞；采用Transwell小室进行MSC和淋巴细胞共培养，流式细胞术检测CD4+CXCR5+ Tfh细胞及其亚群的比例。结果①BDNF组（BDNF刺激的MSC）培养上清IL-10、TGF-β、IDO浓度均高于对照组（加入等体积磷酸盐缓冲液）[IL-10：（42.1±4.4）ng/ml对（19.3±2.1）ng/ml，t=4.761，P=0.009；TGF-β：（13.9±1.7）ng/ml对（5.3±0.6）ng/ml，t=5.129，P=0.008；IDO：（441.3±56.9）ng/ml对（226.7±37.6）ng/ml，t=3.130，P=0.035]；②BDNF组（淋巴细胞与BDNF刺激的MSC共培养）与MSC组（淋巴细胞与MSC共培养）比较：CD4+CXCR5+Tfh细胞比例降低[（3.37±0.21）%对（6.51±0.27）%，t=9.353，P<0.001]，CD4+ CXCR5+ CXCR3+ CCR6−Tfh1细胞比例升高[（41.14±2.04）%对（26.72±2.57）%，t=4.383，P=0.012]，CD4+CXCR5+CXCR3−CCR6−Tfh2细胞和CD4+CXCR5+CXCR3−CCR6+Tfh17细胞比例降低[Tfh2：（30.16±5.38）%对（43.26±4.11）%，t=4.426，P=0.012；Tfh17：（15.61±1.52）%对（22.32±0.72）%，t=4.202，P=0.014]，CD4+CXCR5+Foxp3+ Tfr细胞比例升高[（4.95±0.22）%对（2.32±0.16）%，t=10.241，P<0.001]，淋巴细胞培养上清中IL-21浓度降低[（0.28±0.03）ng/ml对（0.85±0.08）ng/ml，t=6.675，P=0.003]。结论BDNF能够增强MSC抑制Tfh细胞的作用，机制是抑制淋巴细胞中Tfh细胞比例升高及其向Tfh2和Tfh17亚群的分化。