Bacillus spp. 및 Serratia marcescens에 의한 사과 푸른곰팡이병의 생물적 방제

Abstract

사과 푸른곰팡이병을 방제하기 위하여 사과, 배, 복숭아 등 370점의 과일을 채취하여 과일표면으로부터 세균 1,080균주를 분리하였다. 분리한 1,080균주를 공시 하여 사과 저장병을 일으키는 Penicillium expansum, Alternaria alternata 그리고 Botrytis cinerea을 대상으로 항균활성 및 병 진전억제효과를 검정하여 8종의 길항세균을 선발하였다. 이 들 길항세균에 대한 세균학적 특성과 Biolog system에 의한 영양원 이용성을 조사한 결과 Bacillus amyloliquefaciens가 2균주, B. megaterium, B. subtilis var. gladioli, B. licheniformis， B. pumilus 및 Serratia marcescens로 동정하였다. Glucose, mannose, starch 등 8종의 탄소원을 공시하여 병원균의 생장 및 길항균의 중식에 미치는 영향을 조사한 결과, 병원균의 증식을 억제하고 길항균의 증식을 촉진하는 영양원으로 glucose가 선발되었다. 길항균의 처리효과를 높이기 위하여 길항균 현탁액에 glucose를 1% 첨가하여 사과에 처리한 다음 푸른곰팡이 병균을 <TEX>$10^5$</TEX>포자/ml 농도로 처리하였을 때, 병 진전억제효과가 S. marsecens P76-9처리에서 48%, B. amyloliquefaciens P43-2 처리에서 46% 그리고 B. licheniformis P94-1 처리에서 14% 증가되었다. 사과표면의 상처부위에서 처리한 길항균의 밀도변동에 있어서는 Bacillus 속 세균인 B. amyloliquefaciens P43-2과 B. licheniformis P94-1는 처리 후 7일까지 밀도가 증가하다가 처리 후 10일부터는 감소되는 경향이었으며, S. marsecens P76-9는 초기(처리 후 4일)에는 밀도가 감소되다가 처리 후 7일부터 증가되어 처리 후 7일까지도 일정한 수준으로 밀도가 유지되었다. The 1080 epiphytic bacteria obtained from 370 samples of pome and stone fruits including apple, pear, peach, grape, apricot and Chinese quince were screened for antagonistic activity against postharvest pathogens, Penicillium expansum, Alternaria alternata and Botrytis cinerea. Among tested antagonistic bacteria, eight bacterial isolates inhibited mycelial growth of the postharvest pathogens and were identified as Bacillus amyloliquefaciens (three strains), B. megaterium, B. subtilis var. gladioli, B. licheniformis, B. pumilus and Serratia marcescens based on biochemical characteristics and utility of carbon and nitrogen compounds (Biolog system). Eight carbohydrates were evaluated for their effect on mycelial growth and germination of the postharvest pathogen, P. expansum to select nutrients for enhancing bio-control efficacy. The growth of four selected antagonists, B. amyloliquefaciens P43-2, B. amyloliquefaciens A71-2, B. licheniformis P94-1, and S. marcescens P76-9 were also tested. As a result, 1% glucose (w/v) strongly stimulated growth of the antagonists, suppressed mycelial growth of the postharvest pathogen, and had a little comparatively stimulatory effect on germination of the the postharvest pathogen. It was confirmed that the addition of 1% glucose (w/v) greatly enhanced biocontrol effect of B. amyloliquefaciens P43-2, B. licheniformis P94-1, and S. marcescens P76-9. Application of B. amyloliquefaciens P43-2, B. licheniformis P94-1, and S. marcescens P76-9 with the addition of 1% glucose (w/v) increased the control efficacy up to 48%, 46%, 14% compared with those of the antagonists without glucose, respectively. When the antagonists were applied to control postharvest disease caused by P. expansum in apple wounds, the population of B. amyloliquefaciens P43-2 and B. licheniformis P94-1 increased until 4 days after inoculation (DAI) of the antagonists and then decreased from 10 DAI. Meanwhile the population of S. marcescens P76-9 decreased at early stage (4 DAI), but increased from 7 DAI, and finally maintained constantly until 10 DAI in apple wounds.