Abstract
A espécie Ocimum gratissimum L., popularmente conhecida como alfavaca, é uma planta muito usada na medicina tradicional brasileira, à qual são atribuídas diversas atividades terapêuticas quando usada na forma de infuso de suas folhas. Neste estudo foi realizada a caracterização fitoquímica, a avaliação da ação antioxidante e a investigação dos efeitos antimutagênico e antigenotóxico, além do efeito mutagênico e genotóxico potencial do extrato aquoso liofilizado a parir das folhas de O. gratissimum (EAOG). O conteúdo de polifenóis totais no extrato foi determinado pelo método Folin-Ciocalteu, sendo encontrado 11,3 µg EAG/mg de EAOG. A atividade antioxidante foi avaliada pelo teste do 1,1-difenil-2-picril hidrazil (DPPH•), apresentando IC50 de 83,0 µg/mL. A antimutagenicidade e mutagenicidade foram avaliadas em cepas de Salmonella typhimurium (TA98 e TA100) utilizando o teste Salmonella/microssoma (Salmonella typhimurium/microssomas) em diferentes concentrações. EAOG induziu a atividade antimutagênica para a cepa TA98. A mutagenicidade não foi observada para o extrato em ambas as linhagens. Adicionalmente, a ação antigenotoxica avaliada pelo teste de clivagem do DNA-plasmidial também foi observada para EAOG. Os resultados também demonstraram que o extrato não foi capaz de induzir a genotoxicidade pelo teste empregado. Este estudo relata, pela primeira vez, as propriedades antimutagênica e antigenotóxica do extrato aquoso de O. gratissimum.
Highlights
INTRODUÇÃO O interesse por compostos antioxidantes é cada vez maior atualmente uma vez que o estresse oxidativo pode causar danos à nível molecular, como, por exemplo, danos ao DNA, desempenhando papel importante nos processos de mutagênese e carcinogênese (Marín-Martinez e colaboradores, 2009)
Reagentes Todos os solventes orgânicos foram adquiridos da Vetec, bem como os reagentes: sulfato de magnésio heptahidratado, ácido cítrico, fosfato de sódio e amônio, fosfato de potássio dibásico, cloreto de sódio, L-histidina, azida sódica, glicose e cloreto de estanho
Os diferentes tipos de compostos fenólicos (flavonoides e taninos) e o teor de polifenóis totais de extract of the O. gratissimum (EAOG) (11,3 μg equivalente de ácido gálico (EAG)/mg de EAOG) associados ao seu potencial antioxidante (IC50 83,00 μg/mL) são possivelmente responsáveis pela moderada percentagem de inibição mutagênica observada (acima de 50% para a cepa TA98), além da potencial atividade antigenotóxica de EAOG
Summary
Reagentes Todos os solventes orgânicos foram adquiridos da Vetec, bem como os reagentes: sulfato de magnésio heptahidratado, ácido cítrico, fosfato de sódio e amônio, fosfato de potássio dibásico, cloreto de sódio, L-histidina, azida sódica, glicose e cloreto de estanho. A cada concentração da mistura testada, foram adicionados 500 μL de tampão fosfato pH 7,4, 100 μL de cultura de bactéria (D.O.600nm 0,4) e agentes mutagênicos, sendo, posteriormente, incubados a 37oC por 30 min. Para o ensaio de antigenotoxicidade, EAOG nas doses de 62,5, 125 e 250 mg foi incubado com 100 mg de DNA plasmidial pUC18 e 500 mg do agente genotóxico cloreto de estanho (SnCl2) por 2,5 horas a 37°C. Já no teste de genotoxicidade, as doses de 62,5, 125 e 250 mg de EAOG foram incubadas com 100 mg de DNA plasmidial pUC18 na ausência do agente genotóxico SnCl2. Para os testes mutagênicos os resultados foram avaliados por análise de médias (Teste de Student – teste T) entre as médias da razão de mutagenicidade do controle negativo e as médias da razão de mutagenicidade nas diferentes doses testadas, seguido de regressão linear
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