Automated assessment of spinal fluid examination results in passivehemagglutination reaction in neurosyphilis diagnostics

N V Kitaeva,A P Suslov,V G Nesterenko,N V Frigo,N V Kitayeva,G L Katunin,S V Rotanov

doi:10.25208/vdv809

Abstract

Spinal fluid samples collected from 50 patients suffering from neurosyphilis (key group) and 30 patients with a nervous system pathology and craniocerebral injuries without any signs of syphilis in the anamnesis (control group) were examined in the course of regulated serological tests to reveal anti-T. pallidum antibodies (complement-fixation test with a treponemal antigen, complementfixation test with a cardiolipin antigen, immunofluorescence test with whole spinal fluid, ELISA) as well as in the course of TPHA with the use of modified methods with the end-point dilution of spinal fluid as 1:4. Visual assessment was used to assess the TPHA results with the determination of the result positivity degree expressed in conditional units - «pluses», along with the automated assessment using the Criterion 2 hardware system. Comparative results of visual and instrumental assessments of the spinal fluid study results in TPHA revealed full compliance of the qualitative study results and 97.5% correspondence in the results expressed in conditional units («pluses»), which provides sufficient grounds for recommending the Criterion 2 automatic diagnostics complex for TPHA image assessment to be used in clinical and diagnostic laboratories in health care institutions for determining treponemal specific antibodies in spinal fluid for neurosyphilis diagnostics.

Highlights

Образцы ликвора, полученные от 50 пациентов с нейросифилисом и 30 пациентов с патологией нервной системы и черепно-мозговыми травмами без указаний в анамнезе на наличие у них сифилитической инфекции, исследованы в регламентированных серологических тестах для определения антител к T. pallidum (РСКт, РСКк, РИФц, иммуноферментный анализ (ИФА)), а также в реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) с применением модифицированной методики в конечном разведении ликвора 1:4
Установлено, что у всех 50 пациентов с нейросифилисом результаты исследования сыворотки крови в РИФабс/200, ИФАIgG+IgM, РСКт и РПГА были положительными (100%), а у 30 пациентов группы контроля — отрицательными (100%)
При исследовании образцов ликвора больных нейросифилисом положительные результаты РСКк были зарегистрированы в (90%) случаях, РИФц и РСКт — в (92%), ИФА — в (94%), РПГА — в 50 (100%)

Summary

Материал и методы

Проведено клинико-лабораторное обследование 50 больных нейросифилисом (основная группа) и 30 лиц (без указаний в анамнезе на наличие сифилиса) с патологией нервной системы и черепномозговыми травмами, которым по медицинским показаниям проводили люмбальную пункцию (контрольная группа). Результаты РПГА оценивали визуально с определением качественного значения теста (положительный или отрицательный) и степени позитивности реакции, выраженной в условных единицах — «плюсах» (от +/до 4+), а также с использованием автоматизированного учета на аппаратном комплексе «Критерий-2». Принцип работы прибора заключается в сканировании и отображении на экране монитора персонального компьютера изображений результатов РПГА, регистрируемых на U-образном дне реакционной лунки иммунологического планшета, и переводе этих результатов в цифровые значения регрессии[1] от 0 до 100. По завершении анализа изображений результат исследования представляется в виде математического значения по шкале регрессии в условных единицах («плюсах») и общего заключения, характеризующего наличие или отсутствие в исследуемом образце антител к антигенам T. pallidum. 1. Соответствие визуальной (в «плюсах») и автоматизированной (значения по шкале регрессии) оценки результатов исследования в РПГА

Антитела в образце обнаружены

Результаты и обсуждение

Findings

Полное расхождение