原子转移自由基聚合(ATRP)阳离子化菊粉作为非病毒基因载体的研究

Abstract

利用原子转移自由基聚合（ATRP）将聚甲基丙烯酸 N ， N -二甲氨基乙酯[P（DMAEMA）] 偶联到菊粉多糖（Inulin）上，合成了新型基因载体PDIN. 利用核磁共振仪、 动态光散射分析仪、 透射电子显微镜和凝胶电泳对PDIN及其与质粒pDNA的复合物进行了表征. 凝胶阻滞实验结果表明，PDIN可以通过静电相互作用稳定结合pDNA. 噻唑蓝（MTT）细胞毒性测试、 溶血实验、 绿色荧光蛋白表达质粒（pGFP）及 β 半乳糖苷酶表达质粒（p β gal）转染实验结果表明，PDIN对MCF-7，Hela，COS7和HepG2细胞的毒性较小；其溶血率低，具有良好的血液相容性；载体PDIN能有效将pGFP和p β gal带入COS7细胞并表达，在 N / P 为1时转染效率最高，其 β 半乳糖苷酶的酶活为（3.36±0.74） U/mg蛋白，比Lipo2000转染效率[（4.33±0.77） U/mg蛋白] 略低. 因此，所合成的载体PDIN是一种有潜在应用价值的非病毒基因载体.