Antiproliferative effect of silencing LSD1 gene on Jurkat cell line and its mechanism

Abstract

目的探讨RNA靶向沉默LSD1基因后对急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法将LSD1短发夹RNA（shRNA）真核表达载体经脂质体转染入Jurkat细胞，采用RQ-PCR及Western blot方法观察LSD1 mRNA及蛋白表达；采用MTT法观察细胞增殖情况，采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况，Western blot方法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、procaspase-3的表达及组蛋白H3K4me、H3K4me2、H3K4me3、Act-H3水平。结果LSD1 shRNA转染Jurkat细胞后，LSD1 mRNA、蛋白表达均下调（P<0.05）；LSD1 shRNA组48 h细胞增殖率低于转染阴性质粒（Neg-shRNA）组和对照组（P<0.05），LSD1 shRNA组细胞凋亡率[（41.34±3.58）%]高于NegshRNA组[（3.45±1.54）%]和对照组[（1.76±0.52）%]（P<0.05）；凋亡抑制蛋白Bcl-2、凋亡效应蛋白procaspase-3的表达下调，Bax表达上调，H3K4me、H3K4me2、Act-H3表达上调，而H3K4me3水平未见明显变化。结论沉默LSD1基因可抑制Jurkat细胞增殖，激活凋亡相关蛋白诱导细胞凋亡，机制可能与调节组蛋白H3K4甲基化水平有关。