Abstract
Tradicionalmente las hojas de Oenothera rosea “chupasangre” son usadas para reducir los hematomas, por lo que, esta investigación estuvo dirigida a la evaluación de los componentes capaces de retardar la coagulación sanguínea. Del extracto etanólico de O. rosea se separó por cromatografía de capa fina en celulosa, usando etanol: agua (1:5), dos fracciones F-2 y F-5, que luego fueron preincubadas por 10 minutos con trombina y el veneno de la serpiente Lachesis muta, rico en Enzima Semejante a Trombina (EST) y luego se midió la actividad coagulante sobre plasma humano citratado y fibrinógeno bovino (Fb), así como el sustrato cromogénico BApNA. Los resultados mostraron que F-2 alargó el tiempo de coagulación sobre Fb en 58,58 % y el F-5 en 67,78 %, mientras que usando veneno los retardos fueron para F-2 10,67 % y F-5 36,27 %. Usando plasma, los valores fueron para F-2 34,14 % y F-5 70,59 %. Asimismo, empleando trombina la actividad amidolítica se redujo en F-2 48,48 % y F-5 67,32 %, mientras que con la EST de L. muta la inhibición de F-2 50,20 % y F-5 69,10%. Mediante estos ensayos in vitro se concluye que F-2 y F-5 podrían ser flavonoides anticoagulantes, con probable acción antitrombolítica.
Highlights
Uno de los problemas de salud de mayor importancia para el ser humano está relacionado con la obstrucción parcial o total del sistema circulatorio por aparición de trombos
Algunas investigaciones han mostrado que los flavonoides como las quercetinas (Quer), pueden actuar como inhibidores competitivos de la trombina debido a su acoplamiento estérico a la His 57, parte del centro activo de la enzima, dicho acoplamiento es más estable si el flavonoide está glicosilado como ocurre con la Quer-ramnosil y la Quer-arabinosa[7]
Lima: Pontificia Universidad Católica del Perú ; 2016
Summary
Muestras de Oenothera rosea Las muestras de Oenothera rosea Aiton fueron recolectadas en el distrito de Matucana, provincia de Huarochirí departamento de Lima, a 2378 m.s.n.m., en el periodo de octubre 2015 a febrero 2016. Las fracciones F-2 y F-5 fueron seleccionadas para los ensayos de la actividad anticoagulante, pues fueron capaces de retardar el tiempo de coagulación del plasma humano citratado. Para medir la actividad coagulante se preincubó 0,2 mL del sustrato y 0,1 mL de Buffer Tris a 37 °C, adicionándose luego 0,1 mL de veneno o trombina comercial. Para la medición de la actividad específica, se calculó las inversas del tiempo de coagulación y se dividió entre los mg de proteína utilizada. 100 uL de cada preincubado fueron adicionados a las mezclas de reacción que contenían plasma o fibrinógeno, midiéndose el tiempo de coagulación en segundos. La Actividad Específica Amidolítica (AEA) fue calculada por los moles de p-Nitroanilina liberados por minuto por miligramo de proteína (U/mg)[14]
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