Abstract

RESUMOO cultivo ininterrupto e intensivo de tomateiro tem favorecido o estabelecimento de diversas doenças que afetam a produção e a qualidade dos frutos. A resistência genética é o melhor método para o controle da doença chamada 'viracabeça' (causada por distintas espécies do gênero Tospovirus), sendo o Sw-5 o primeiro gene de resistência efetivamente identificado para o seu controle no tomateiro. Objetivou-se avaliar novas potenciais fontes de resistência às tospoviroses, em germoplasma de espécies selvagens de Solanum (Lycopersicon), bem como conduzir análises filogenéticas relacionadas à característica evolutiva do gene Sw-5b, em acessos de espécies selvagens de tomateiro. Essas análises evidenciaram que as diferentes espécies de tomateiros pertencem a distintos grupos evolutivos. A maioria dos acessos com resistência ampla contra espécies de Tospovirus correspondem a variantes alélicas muito próximas da cópia original do gene Sw-5b. No entanto, acessos resistentes de S. chilense e S. habrochaites localizamse em grupos filogeneticamente distintos, indicando que eles podem representar fontes promissoras de novos genes/alelos, condicionando resistência ampla aos tospovírus.

Highlights

  • The intensive and uninterrupted tomato cultivation has favored the establishment of several diseases that affect fruit yield and quality

  • Objetivou-se avaliar novas potenciais fontes de resistência às tospoviroses, em germoplasma de espécies selvagens de Solanum (Lycopersicon), bem como conduzir análises filogenéticas relacionadas à característica evolutiva do gene Sw-5b, em acessos de espécies selvagens de tomateiro

  • Essas doenças são causadas por diversos fitopatógenos, sendo as de origem viral as que proporcionam maiores dificuldades de controle

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Summary

MATERIAL E MÉTODOS

Avaliou-se a presença do fator de resistência Sw-5b, por análise molecular, em 62 linhagens e variedades comerciais de tomateiro. Os acessos foram analisados para confirmação da presença do gene de resistência Sw-5b e posterior análise evolutiva desta região genômica do tomateiro. Após a extração de DNA, foi realizada Polymerase Chain Reaction (PCR), para confirmar a presença da região promotora do gene de resistência Sw-5 nos diferentes acessos de tomateiro. A reação de sequenciamento foi realizada de acordo com o protocolo do kit BigDye®, utilizando-se, para tanto, 2 ml dos amplicons obtidos. O sequenciamento dos DNAs foi obtido por meio de um sequenciador automático ABI Prism 3100 (Applied Biosystems of Brazil, São Paulo, SP), pertencente ao Laboratório de Análise Genômica da Embrapa Hortaliças. As sequências dos 13 acessos destinados à análise evolucionária do gene Sw-5b (dez acessos selvagens pertencentes ao BAG da Embrapa Hortaliças, mais as cultivares ‘Tospodoro’, ‘Viradoro’ e ‘Stevens’) foram alinhadas com o programa CLC Main Workbench 6.9.2 (CLCBio, Aarhus, Denmark). Um dendrograma demonstrando a distância filogenética entre os genes/alelos foi gerado utilizando-se o método ClustalW do programa Mega 6.06 (Tamura et al 2013)

RESULTADOS E DISCUSSÃO
TCSV CSNV
Findings
Stevens Tospodoro
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