10.4314/cajeb.v3i1.37960

Abstract

A study was conducted to identify some Cameroonian Meloidogyne species by the polymerase chain reaction (PCR). Meloidogyne isolates from various host crops in fifteen localities of the South West, West, and North West Provinces of Cameroon, were cultured on susceptible tomato in a greenhouse in Munster, Germany. DNA was extracted from Meloidogyne second-stage juveniles extracted from the tomato roots, and used in the PCR as template. The PCR product was loaded onto a 2% agarose gel, and the DNA bands on the gel visualised under short-wave (254 nm) ultraviolet transillumination. The Meloidogyne species were identified by comparing their DNA fragment sizes with the molecular weight marker in the same gel. Three sizes of DNA amplification products were obtained: 1200 base pairs (bp), 1500 bp, and 420 bp corresponding, respectively, to M. incognita, M. hapla, and M. arenaria . No DNA amplification was observed using the M. javanica specific primers. Meloidogyne incognita was the most common species; M. hapla was found in areas of high altitudes such as Pastoral, Djutitsa (West Province) and Bambui Upper Farm (North West Province); while M. arenaria was identified only in peanut (A. hypogaea), its principal host. Une etude a ete menee pour identifier quelques especes camerounaises de Meloidogyne a l'aide de l'amplification de l'ADN par la technique de « PCR » (i.e. « polymerase chain reaction »). Les isolats de Meloidogyne provenant de diverses plantes hotes provenant de quinze localites dans les provinces du Sud-Ouest, de l'Ouest, et du Nord-Ouest au Cameroun, ont ete eleves sur la tomate sensible dans une serre a Munster, Allemagne. L'ADN a ete extrait des larves de deuxieme stade de Meloidogyne obtenues des racines de la tomate, et utilise dans la « PCR » comme matrice. Le produit de l'amplification a ete analyse sur gel d'agarose 2%, et les bandes de l'ADN visualisees sous trans-illumination ultraviolette a 254 nm. Les especes de Meloidogyne ont ete identifiees en comparant la taille (en paires de base, bp) des fragments de l'ADN avec les marqueurs de poids moleculaires dans le meme gel. Trois produits d'amplification de l'ADN ont ete obtenues : les fragments de 1200 paires de bases (pb), 1500 pb, et 420 pb, correspondant respectivement, a M. incognita, M. hapla, et M. arenaria. Aucune amplification d'ADN n'etait observee lorsque les amorces specifiques a M. javanica etaient utilisees. vMeloidogyne incognita etait l'espece la plus repandue ; M. hapla etait rencontree dans les zones de de hautes altitudes telle que Pastoral, Djutitsa et Bambui Upper Farm ; tandis que M. arenaria n'etait identifiee que dans l'arachide (A. hypogaea), son hote principal. Cameroon Journal of Experimental Biology Vol. 3 (1) 2007: pp. 30-36