Вплив нейротрофічних факторів на популяцію серотонінергічних нейронів n.raphe в умовах культивування

Abstract

Актуальність. Молекулярні механізми спеціалізації серотонінергічних нейронів зі стовбурових і прогеніторних нервових клітин вивчені далеко не повністю. Мета дослідження — визначення найбільш ефективних нейроіндукторів, що підтримують життєздатність та функціональну активність серотонінергічних нейронів та їх детермінованих попередників. Як критерії оцінки були обрані: експресія відповідних генів, загальний вміст серотоніну та чисельність серотонінергічних нейронів, візуалізованих за допомогою гістохімічної реакції. Матеріали та методи. Робота була виконана на суспензійній культурі клітин зони n.raphe з використанням гістохімічних методів, імуноферментного аналізу та полімеразної ланцюгової реакції. Результати. Установлено, що BDNF та NGF стимулюють збільшення чисельності серотонінергічних нейронів у дисоційованій культурі в 1,6 та 2 рази порівняно з контрольними зразками. Додавання в культуральне середовище BDNF та ретиноєвої кислоти призводить до зростання вмісту серотоніну в культуральному матеріалі. Експресія гена Nkx 2.2, що є маркером мітотично-активних попередників серотонінергічних нейронів, підтримується за наявності BDNF і збільшується під впливом EGF та FGFb. Експресія гена Pet1, що свідчить про наявність детермінованих прогеніторів серотонінергічних нейронів, підтримується всіма досліджуваними факторами, за виключенням екзогенного серотоніну. Експресія гена Tph1, маркера початку синтезу серотоніну, спостерігається під впливом FGFb, EGF та NGF. Висновки. Таким чином, наші дані показали, що вищевказані нейроіндуктори впливають на різні фази серотонінгенезу і можуть бути використані для його регуляції.