잎새버섯(Grifola frondosa)의 자실체에서 추출한 조다당류의 면역증강 및 항암효과

Abstract

잎새버섯의 자실체로부터 메탄올, 중성염용액 및 열수를 이용하여 조다당류를 추출하고 ICR mouse에 주사하여 항암 및 면역증강 효과를 조사하였다. 잎새버섯 조다당류의 Sarcoma 180 및 RAW 264.7에 대해 세포독성을 조사한 결과 10~2000 <TEX>${\mu}g/ml$</TEX>의 조다당류 농도에서 각각의 세포는 독성을 나타내지 않았고, HT-29 및 NIH3T3 세포의 경우에는 중성염용액으로 추출한 조다당류 10~1000 <TEX>${\mu}g/ml$</TEX>의 농도에서는 독성을 보이지 않았으나 2000 <TEX>${\mu}g/ml$</TEX>의 농도에서는 약한 독성을 나타내었다. Sarcoma 180으로 접종된 ICR mouse에 잎새버섯의 자실체에서 추출한 각각의 조다당류를 투여한 실험군은 조다당류를 투여하지 않은 대조군에 비해 평균수명이 각각 25.0~52.9% 연장되었다. 열수로 추출한 조다당류를 200 <TEX>${\mu}g/ml$</TEX>의 농도를 처리한 비장세포 수는 대조군에 비하여 1.3배 증가하였으며, 200 <TEX>${\mu}g/ml$</TEX>의 농도로 중성염추출 조다당류를 투여한 실험군 생쥐 B 임파구의 alkaline phosphatase 활성은 대조군에 비해 약 1.5배 증가하였다. 대식세포 RAW 264.7에 의해 발생된 nitric oxide(NO)의 농도는 대조군이 4.3 <TEX>${\mu}M$</TEX>인 것에 비해 중성염 추출 조다당류를 50~500 <TEX>${\mu}g/ml$</TEX>의 농도로 처리한 실험군의 대식세포는 10~14 <TEX>${\mu}M$</TEX>의 nitric oxide를 발생시켰다. 메탄올, 중성염용액 및 열수로 추출한 조다당류로 처리한 비장세포는 모든 농도에서 대조군에 비해 TNF-<TEX>${\alpha}$</TEX>, IL-<TEX>$1{\beta}$</TEX>, IL-2, IL-6 등의 사이토카인 분비량이 1.4배 이상 높았다. 메탄올 추출 조다당류를 50 mg/kg body weight의 농도로 투여한 실험군의 총 복강세포의 수와 백혈구의 수는 대조군에 비하여 각각 3.0배, 2.0배 증가하였다. 따라서 잎새버섯의 자실체에서 추출한 조다당류는 생쥐의 면역을 증강시키고 Sarcoma 180에 대한 항암효과가 있는 것으로 사료된다. 80% methanol and 0.9% neutral saline soluble and hot water substances (hereinafter referred to Fr. NaCl, Fr. HW and Fr. MeOH, respectively) were extracted from fruiting bodies of Grifola frondosa. In vitro cytotoxicity tests, crude polysaccharides were not cytotoxic against cancer cell lines such as Sarcoma 180 and RAW 264.7 at the concentration of 10~2000 <TEX>${\mu}g/ml$</TEX>, but crude polysaccharides from Fr. NaCl was slightly toxic to HT-29 and NIH3T3 at the concentration of 2000 <TEX>${\mu}g/ml$</TEX>. Intraperitoneal injection with crude polysaccharides exhibited life prolongation effect of 25.0~52.9% in mice previously inoculated with Sarcoma 180. Fr. HW increased the numbers of spleen cells by 1.3 fold at the concentration of 200 <TEX>${\mu}g/ml$</TEX> compared with control. Fr. NaCl improved the immuno-stimulating activity of B lymphocyte by increasing the alkaline phosphatase activity by 1.5 fold compared with control at the concentration of 200 <TEX>${\mu}g/ml$</TEX>. 10~14 <TEX>${\mu}M$</TEX> of nitric acid were generated when Fr. NaCl was added to RAW 264.7 at the concentration of 50~500 <TEX>${\mu}g/ml$</TEX>, while the control group produced 4.3 <TEX>${\mu}M$</TEX> of nitric oxide. The Fr. NaCl, Fr. HW and Fr. MeOH increased the production of TNF-<TEX>${\alpha}$</TEX>, IL-<TEX>$1{\beta}$</TEX>, Il-2 and IL-6 by more than 1.4 times compared with the control group. The Fr. of MeOH increased the numbers of peritoneal exudate cells and circulating leukocytes by 3.0 and 2.0 folds compared with the control at the concentration of 50 <TEX>${\mu}g/ml$</TEX>, respectively. Therefore, the crude polysaccharides extracted from fruiting bodies of Grifola frondosa could improve antitumor activity of mice.