Сравнительный анализ гемопоэтической активности суммарной РНК костного мозга и лимфоидных клеток селезенки при хронической бензольной анемии у крыс

Abstract

Цель - оценка лечебных свойств суммарной РНК на модели хронической гипопластической анемии, выявление особенностей гемопоэтического действия суммарных РНК, выделенных из костного мозга и лимфоидных клеток селезенки. Методика. Работа выполнена на 36 белых беспородных крысах-самках массой 130-250 г. Хроническую токсическую анемию моделировали подкожным введением смеси химически чистого бензола (0,05 мл/100 г) и стерильного растительного масла. Смесь вводили трижды с интервалом в 7 сут. Контрольным животным (группа 1 в каждой серии) в эти же сроки внутривенно вводили равное по объему количество 0,9% раствора NaCl. Выполнено 2 серии экспериментов. В 1-й серии оценивали гемопоэтическую активность суммарных РНК лимфоидных клеток селезенки, во 2-й - суммарных РНК костного мозга. Препараты суммарной РНК получали из костного мозга и лимфоидных клеток селезенки интактных крыс, а также из клеток тех же органов крыс, подвергнутых кровопусканию (2% от массы тела) за 17 ч до выделения из них РНК. Суммарную РНК выделяли методом гуанидин тиоцианат-фенол-хлороформной экстракции. Для выяснения влияния суммарных РНК на состояние эритроидного ростка костного мозга в препаратах, окрашенных по Паппенгейму, оценивали количественный и качественный состав эритроидных островков. Результаты. Сравнение гемопоэтической активности суммарных РНК, выделенных из костного мозга и лимфоидных клеток селезенки здоровых животных, при их введении крысам с экспериментальной хронической бензольной анемией, показало, что различия клеточного состава лимфоидных органов-источников РНК отражается на их гемопоэтических свойствах. Суммарная РНК из лимфоидных клеток селезенки интактных животных в первую очередь способствует восстановлению количества лейкоцитов, в то время как суммарная РНК лимфоидных клеток костного мозга в начальный период регенерации не оказывает заметного влияния на лейкопоэз. Показано также, что суммарная РНК, выделенная из костного мозга, в целом обеспечивает более интенсивный процесс гемопоэза. Кроме того, обнаружена более высокая эритропоэтическая активность суммарных РНК, выделенных из клеток обоих лимфоидных органов крыс-доноров, стимулированных кровопотерей, по сравнению с таковой суммарных РНК, полученных из органов интактных крыс. Заключение. Подтверждена гемопоэтическая активность суммарной РНК костного мозга и лимфоидных клеток селезенки при гипопластической анемии. Выявлена более высокая эритропоэтическая активность суммарных РНК обоих лимфоидных органов животных после кровопускания по сравнению с их лейкопоэтической активностью. Aim. To evaluate therapeutic properties of total RNA on a model of chronic hypoplastic anemia and to elucidate features of the hemopoietic effect of total RNA isolated from bone marrow splenic lymphoid cells. Methods. Experiments were performed on 36 white mongrel rats weighing 230-250 g. Chronic toxic anemia was induced by subcutaneous injections of a mixture of chemically pure benzene (0.05 ml/100 g) and sterile vegetable oil. The mixture was injected three times with an interval of 7 days. Control animals (group 1 in each series) received intravenous injections of an equal volume of saline at the same time intervals. Two experimental series were performed. In series 1 and 2, hemopoietic activity of total RNAs from splenic lymphoid cells and from bone marrow, respectively, was evaluated. Total RNA was obtained from splenic lymphoid cells and from bone marrow of intact rats and rats subjected to hemorrhage (2% of body weight) 17 h prior to the RNA isolation. Total RNA was isolated by guanidine-thiocyanate-phenol-chloroform extraction. The effect of total RNA on the erythroid lineage in the bone marrow was evaluated by the quantitative and qualitative composition of erythroid islets in Pappenheim-stained preparations. Results. Comparing the hematopoietic activity of total RNA isolated from bone marrow and splenic lymphoid cells of healthy animals and administered to rats with experimental chronic benzene anemia showed that the difference in cell composition of the lymphoid organs, sources of the RNAs, impacted on the RNA hemopoietic properties. The total RNA from splenic lymphoid cells of intact animals contributed primarily to the recovery of leukocyte count while the RNA from the bone marrow of intact rats did not significantly influence leukopoiesis during the early regeneration period. It was also shown that the total RNA extracted from the bone marrow generally provided a more intensive hemopoiesis. In addition, the erythropoietic activity of total RNA isolated from the cells of both lymphoid organs of the donor rats stimulated by blood loss was higher than that of the total RNA isolated from intact rats. Conclusion. The total RNA isolated from bone marrow and lymphoid cells spleen exerted a hemopoietic effect in hypoplastic anemia. The erythropoietic activity of total RNA from both lymphoid organs of animals after hemorrhage was higher than the RNA leukopoietic activity.