한국잔디 갈색퍼짐병의 생물학적 방제를 위한 길항미생물의 분리 및 선발

Abstract

본 연구의 목적은 한국잔디에 발생하는 병해 중 가장 큰 피해를 나타내는 갈색퍼짐병의 생물학적 방제를 위해 새로운 길항 미생물을 분리하고 그 방제효과를 기내 및 생물검정을 통해 확인하는 것이다. 갈색퍼짐병에 항균활성을 갖는 길항미생물을 선발하고자 토양으로부터 미생물을 분리하여 R. solani AG2-2 (IV)와의 대치배양을 통해 61균주를 1차로 선발하였으며, 선발 균주 중 R. solani AG2-2(IV)의 균사 생육 억제력이 가장 큰 3종의 균주 I-009, FRIN-001-1 및 YPIN-022를 최종 길항미생물로 선발하였다. 이들 세 분리균주의 16s rRNA 염기서열을 분석한 결과 I-009와 FRIN-001-1은 Bacillus 속에 속하였고, YPIN-022 균주는 Pseudomonas 속의 미생물로 확인되었다. 배양여액을 이용한 R. solani AG2-2 (IV)의 균체량 측정결과 선발 길항미생물 모두 51.7-63.5%의 균체 증식 억제력을 확인하였다. 장성에서 수확한 들잔디의 일종인 장성중지를 생육상에서 활착시킨 후 조사한 생물검정에서 잔디줄기 위에 균체 발생율은 I-009와 YPIN-022 균주 처리구에서 각각 60.3%와 65.0%로 갈색퍼짐병 병원균 단독처리구에 비하여 28.1%와 23.7%의 병 발생 억제효과를 나타냈으나, FRIN-001-1 균주 처리구는 47.8%의 균체발생율을 보여 비교적 높은 43.0%의 병 발생 억제율을 보였다. 본 연구결과 한국잔디 갈색퍼짐병에 대한 병 발생 억제율이 가장 우수한 선발 길항미생물 균주는 FRIN-001-1였고, 향후 추가적인 포장검증을 통해 한국잔디 이용지역을 위한 생물농약 개발에 활용될 수 있을 것으로 기대된다. A large patch disease caused by Rhizoctonia solani AG2-2 (IV) is a serious problem in Korean lawngrass (Zoysia japonica) sites including golf courses and sports fields in Korea. Antagonistic microorganisms against R. solani AG2-2 (IV) were isolated from various forest and crop soil sources in Southern Korea. Among the 61 isolates, I-009, FRIN-001-1, and YPIN-022 strains showing dramatic inhibition of the mycelial growth of R. solani AG2-2 (IV) in the pairing culture were selected as the most potential antagonistic microorganisms for this study. Based on the 16s RNA sequence comparison, I-009 and FRIN-001-1 isolates were identified as Bacillus spp., while YPIN-022 isolate belongs to the genus Pseudomonas. The greater inhibition (clear) zone between two edges of the selected and pathogenic microbes ranged from 11 to 15 mm in three selections, but the others averaged to 7 mm out of 30 mm distance. In another antifungal test using culture filtrate, those three isolates represented a range of 51.7 to 63.5% suppression potential. The selected isolates also inhibited significantly the stem-segment colonization by R. solani AG2-2 (IV) in vivo test by 28.1%, 43.0%, and 23.7% when inoculated with I-009, FRIN-001-1, and YPIN-022, respectively. The highest antagonistic activity for the large patch disease was demonstrated by the isolate FRIN-001-1, which will be useful for developing a bio-pesticide against Rhizoctonia.