Abstract

Цель исследования. Целью работы было изучение генетического разнообразия и структуры бактериальных ансамблей бурой лесной подзолистой почвы и выявление их взаимосвязи с почвенно-химическими и почвенно-микробиологическими свойствами.
 Место и время проведения. Образцы валовой и ризосферной бурой лесной подзолистой почвы отобрали осенью 2014 года из слоя 0-20 см (сразу под подстилкой) с делянок длительного полевого опыта с сосной корейской в Хабаровском крае.
 Методология. Отбирали образцы валовой почвы, а также почвы ризосферы корней сосны путем осторожного встряхивания корней и сбора оставшейся на них почвы. В отобранных образцах почвы определяли химические (pH, содержание органического вещества, обменных форм питательных элементов) и микробиологические (содержание биомассы почвенных микроорганизмов, базальное и субстрат-индуцированное дыхание почвы) свойства, а также экстрагировали метагеномную ДНК. Эту ДНК использовали в качестве матрицы для амплификации гипервариабельных районов (V3-V4) генов 16S рРНК с помощью универсальных бактериальных праймеров, и ампликоны секвенировали с помощью Illumina MiSeq. Полученные последовательности идентифицировали до индивидуальных операционных таксономических единиц (ОТЕ) на уровне сходства 97%. Далее матрицы данных с обилием ридов ОТЕ анализировали с помощью методов главных компонент, многомерного шкалирования и дисперсионного анализа. Также рассчитывали индексы α- и β- разнообразия
 Основные результаты. В бактериальных ансамблях бурой лесной подзолистой почвы под сосной корейской в естественных для нее условиях было выялено 400 ОТЕ, из которых 42 являлись доминантными, т.е. имели вклад ≥1% в общее число последовательностей). Основными типами являлись Acidobacteria (34% общего числа последовательностей), Proteobacteria (25%) и Actinobacteria (9%). При этом видовое богатство бактериальных ансамблей было определено первым доминирующим типом, а выравненность – вторым доминирующим типом. Основными классами оказались Alphaproteobacteria (21%), группа 1 Acidobacteria (13%) и Ktedonobacteria (12%). Среди первых 5 доминантных ОТЕ две ОТЕ встречались во всех образцах, и это были ОТЕ, относящиеся к Rhizobiales, т.е. азотфиксирующим бактериям. Индексы α-разнообразия не отличались между образцами, а индекс β- разнообразия были больше для образцов с разных делянок, чем для образцов валовой и ризосферной почвы.
 Заключение. Впервые выявлен состав бактериальных ансамблей бурой лесной подзолистой почвы под сосной корейской в искусственном моновидовом фитоценозе в естественных для этого вида условиях окружающей среды. Доминирование азотфиксирующих организмов в почве под сосной корейской свидетельствует об особой важности азотфиксации для роста и развития этого высокопродуктивного вида. Впервые выявленная положительная связь видового разнообразия ансамблей почвенных бактерий с содержанием микробиального углерода в органическом веществе почвы важна для расширения диапазона значимости этого показателя как стандартного индикатора качества почвы.

Highlights

  • Цель исследования: Целью работы было изучение генетического разнообразия и структуры бактериальных ансамблей бурозема элювиированного и выявление их взаимосвязи с почвеннохимическими и почвенно-микробиологическими свойствами

  • Основными типами являлись Acidobacteria (34% общего числа последовательностей), Proteobacteria (25%) и Actinobacteria (9%)

  • Полевой опыт с географическими культурами кедровых сосен был заложен в 1974 г в Хехцирском лесничестве (48°16' N, 135°02' E, 224 m a.s.l.) Хабаровского края на берозёме элювиированном (Классификация и диагностика почв России, 2004; Полевой определитель ..., 2008), или Haplic Cambisol

Read more

Summary

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Полевой опыт с географическими культурами (климатипами) кедровых сосен был заложен в 1974 г в Хехцирском лесничестве (48°16' N, 135°02' E, 224 m a.s.l.) Хабаровского края на берозёме элювиированном (Классификация и диагностика почв России, 2004; Полевой определитель ..., 2008), или Haplic Cambisol (по международной классификации, WRB, 2014). Содержание углерода микробиальной биомассы (Смик) рассчитывали как разницу концентрации Сорг в экстрактах фумигированной и контрольной почвы, деленную на 0,35 (Vance et al, 1987), а содержание азота микробиальной биомассы (Nмик) рассчитывали как соответствующую разницу в концентрации Nобщ, деленную на 0,54 (Brooks et al, 1985). Субстрат-индуцированное дыхание определяли путем измерения выделения СО2 после добавления глюкозо-минеральной (СИДг) или гистидин-минеральной (СИДгис) смеси (800 мкг С на 1 г сухой почвы). ДНК экстрагировали из почвы с помощью набора DNA Spin Kit for SoilTM (MO Bio Laboratories, Inc USA) в соответствии с инструкцией производителя. Экстрагированную из почв метагеномную ДНК использовали в качестве матрицы для амплификации вариабельного района (V3-V4) генов 16S рРНК с помощью праймеров 343F (5’-CTCCTACGGRRSGCAGCAG-3’) и 806R (5’-GGACTACNVGGGTWTCTAAT-3’) в сочетании с адаптерными последовательностями Illumina, а также баркодами на праймерах. Кривые рарефакции строили и индексы биоразнообразия рассчитывали с помощью статистического пакета PAST 3.19 (Hammer et al, 2001)

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Доминантные ОТЕ
Alphaproteobacter ia
Findings
BIODIVERSITY OF BACTERIAL ASSEMBLAGES IN THE HAPLIC CAMBISOL UNDER KOREAN PINE
Full Text
Published version (Free)

Talk to us

Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have

Schedule a call