대두 추출물의 daidzin 및 glycitin의 동시분석

Abstract

대두 추출물의 daidzin과 glycitin을 HPLC를 이용하여 동시분석하였다. HPLC 분석용매는 water/MeOH/acetic acid (88:10:2)와 MeOH/acetic acid (98:2)를 사용하여 C18 MGII컬럼 (4.6 × 250 mm, 5 μm), 유속 1.0 mL/min, 시료 10 μL를 주입하여 컬럼온도 40℃, PDA detector 검출파장 260 nm에서 검출 한계, 정량 한계, 정밀도, 정확성 및 회수율을 측정하였다. Daidzin과 glycitin 표준용액과 대두 추출물은 다른 물질의 간섭 없이 분리되었으며, 검출시간 및 피크 유지시간과 일치하는 스펙트럼이 나타났다. 검량선의 상관계수(R²)는 0.9999의 직선성이 나타났다. Daidzin의 검출한계는 0.1211 μg/mL, 정량한계는 0.3670 μg/mL, glycitin의 검출한계는 0.0493 μg/mL, 정량한계는 0.1494 μg/mL이었으며, 회수율은 daidzin는 97.36-100.29%, glycitin은 83.67-85.39%이었다. 일간 정밀성은 daidzin에서 1.3120 ± 0.0199 - 1.3348 ± 0.0070 mg/g (RSD 0.5214 - 2.2882%), glycitin은 0.4816 ± 0.0026 -0.4895 ± 0.0111 mg/g (RSD 0.5472 - 2.2752%)으로 분석되었다. 실험실내 정밀성은 daidzin에서 1.33762 ± 0.0079 mg/g (RSD 0.5923%), glycitin은 0.4913 ± 0.0101 mg/g (RSD는2.0549%)으로 나타났다. 대두를 추출온도 및 추출시간을 달리하여 추출한 추출물의 daidzin, glycitin의 함량을 측정한 결과 90℃, 3시간 추출물에서 daidzin의 함량이 0.70 ± 0.01 mg/g, glycitin의 함량이 0.25 ± 0.01 mg/g으로 분석되었으며, 추출 온도 및 추출 시간이 증가함에 daidzin과 glycitin의 함량도 증가하였다. 본 분석방법은 HPLC를 이용하여 대두 추출물의 daidzin과 glycitin를 동시에 분석할 수 있는 기초자료라 판단된다.