국내 자생 그늘쑥 (Artemisia sylvatica MAX) 모상근의 대량배양을 위한 최적조건

Abstract

본 실험은 그늘쑥을 Agrobacterium을 통해 형질전환체인 모상근을 유기하고 모상근의 대량배양을 위해 모상근이 가장 잘 자라는 생장 조건을 찾기 위해 수행되었다. 실험 결과를 종합해 보면 선발된 그늘쑥 모상근 세포주의 대량 생산을 위한 최적 배지는 MS 기본 배지임을 확인하였다. 또한 최적의 havesting time 모상근의 성장률이 좋고 갈변과 배지의 미생물 오염도가 적은 4주가 적당한 것으로 판단된다. 그리고 광 처리 하에서 모상근을 배양하는 것보다는 암상태에서 모상근을 키우고 pH는 5.8 정도가 탄소원은 sucrose로 3.5%가 모상근 을 대량배양시 최적조건임을 확인되었다. 미량원소인 Fe<TEX>$^{2＋}$</TEX>은 0.1 mM을 처리하는 것이 모상근의 성장을 촉진하였으며 spermine과 spermidine은 각각 10 mM와 100 mM로 처리하는 것이 모상근의 성장을 높일 수 있다. 앞으로 연구는 이 결과를 토대로 모상근 대량 배양을 위한 scale up조건과 bioreator의 설계에 관한 연구가 필요하다. This research aims the production of anti-tumor substances through in vitro culture of hairy roots transformed by Agrobacterium rhizogenes in Artemisia sylvatica MAX and the effect of culture conditions on optimum growth of hairy roots. We investigated the optimum medium, pH, carbon source, sucrose, light, Fe and polyamine conditions of various lines of hairy roots (NK3, NK4, YX. NK3-10) induced from Artemisia sylvatica to increase the optimum growth of hairy roots. MS medium was the best for optimum growth of hairy root clone, NK3-S10. The optimum culture period was 4 weeks for NK3-S10. The optimum sucrose concentration was 3.5%. The optimum concentration of FeSO<TEX>$_4$</TEX>, spermine and spermidine was 0.1 mM, 10 mM and 100 mM, respectively.