Abstract
The Herbaspirillum lusitanum P6-12 strain containing the vector plasmid pJN105TurboGFP, which encodes the synthesis of the green fluorescent protein GFP, and which has resistance to the antibiotic gentamicin, was obtained by electroporation. The constructed strain of H. lusitanum P6-12 in cultural, morphological and biochemical properties did not differ from the original typical natural strain of H. lusitanum P6-12. On solid growth media, the recombinant strain formed yellow-green colonies, fluorescent under UV irradiation. Upon inoculation with the resulting culture of plant objects, a green glow of the marked H. lusitanum P6-12 cells, actively colonizing the internal tissues of the host plant, was observed. The created strain can be used as a model strain for studying the patterns and characteristics of the behaviour of organisms in integrated systems, including for tracking bacterial cells during interaction with plants, assessing their survival, competitiveness, etc.
Highlights
Таким образом, для определения динамики распространения клеток H. lusitanum Р6-12 в различных органах инфицированных растений и особенностей их локализации in planta необходима визуализация взаимодействия микроорганизма с корнями и побегами растений
The Herbaspirillum lusitanum P6-12 strain containing the vector plasmid pJN105TurboGFP, which encodes the synthesis of the green fluorescent protein GFP, and which has resistance to the antibiotic gentamicin, was obtained by electroporation
The constructed strain of H. lusitanum P6-12 in cultural, morphological and biochemical properties did not differ from the original typical natural strain of H. lusitanum P6-12
Summary
В работе использовали типовой штамм Herbaspirillum lusitanum P6-12 (IBPPM515), предоставленный Коллекцией ризосферных микроорганизмов ИБФРМ РАН (http://collection. ibppm.ru), с целью оценки его влияния на рост фасоли обыкновенной (Phaseolus vulgaris) и прижизненного маркирования флуоресцентным белком GFP. Фасоль инкубировали в бактериальной суспензии, доведенной до А600~0,1, в течение 30 мин и для дальнейшего роста помещали в высокие биологические пробирки, заполненные стеклянными шариками и 10 мл жидкой среды для растений. Для меченного флюоресцентным белком GFP штамма H. lusitanum P6-12 в среду для растений был добавлен гентамицин (50 мг/мл). Пробирочные растения фасоли выращивали при следующем режиме: фотопериод 16 ч, температура воздуха 24 °C / 19 °C (день / ночь). Определения динамики титра клеток H. lusitanum P6-12 в инфицированных растениях фасоли обыкновенной проводили через 1, 3, 4, 5, 6 и 7 суток после инокуляции. Для оценки влияния культуры H. lusitanum P6-12 на рост P. vulgaris осуществляли инокуляцию трехсуточных проростков фасоли как описано выше и помещали их в торфяные горшочки с вермикулитом. Спустя 40 дней после инокуляции растения осторожно извлекали из горшочков, промывали корни водопроводной водой для удаления частиц вермикулита и определяли сырую биомассу растений
Sign-in/Register to view highlights & summary Sign-in/Register to access full text options 
Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
Schedule a callMore From: Izvestiya of Saratov University. New Series. Series: Chemistry. Biology. Ecology
Disclaimer: All third-party content on this website/platform is and will remain the property of their respective owners and is provided on "as is" basis without any warranties, express or implied. Use of third-party content does not indicate any affiliation, sponsorship with or endorsement by them. Any references to third-party content is to identify the corresponding services and shall be considered fair use under The CopyrightLaw.
