Abstract
Методом многомерной жидкостной хроматографии с использованием ГПХ и обращеннофазовой адсорбционной хроматографии, исследовано молекулярно-массовые и функциональные харктеристики продуктов биосинтеза полисахаридов и полиацетиленовых соединений, базидиальными грибами рода Ganoderma lucidum и Pleurotus ostreatus. Указанные грибы выращивались методом глубинного культивирования в среде, состоящей из пшеничных отрубей на среде Чапека-Докса следующего состава (г/дм3): NaNO3 -2, K2HPO4 -1, MgSO4·7H2O-0.5, KCl-0.5, FeSO4·H2O-0.01, глюкоза-30 и H2O. Культивирование проводилось в термостате при 28оС. После 10 суток выдержки в составе их мицелл обнаружены полисахариды и полиацетиленовые соединения. Далее образующуюся биомассу грибов измельчали и экстрагировали метиловым эфиром уксусной кислоты и водой. Осадок и экстракт в отдельности разделены в указанной хроматографической системе. Установлено, что в водном экстракте количество полисахаридов достигает до 70-80%, а в эфирном экстракте содержание полиацетиленовых соединений меняется в пределах 65-70%. Таким образом, метод GPC позволил выявить в составе продуктов биосинтеза 5 фракций, в том числе 4 полисахаридов, состоящие из гексаозы (Мw=Mn=1085), гептаозы (Мw=Mn=1260) и из двух олигосахаридов с Мw и Mn 4390, 3600 и 5450, 4500, соответственно, и одна полиацетиленовая (Мw =180, Mn =150). Методом обращенно-фазовой адсорбционной хроматографии в рабочей волне УФ-детектора в составе полиацетиленовой фракции обнаружены 5 подфракций по химической природе относяхщихся к полиацетиленовым кислотам и спиртам сопряженными двойными и тройными связями в различных сочетаниях. С целью изучения химического состава обнаруживаемых подфракции, фракция полиацетилена подвергнута препаративному разделению. Разделение обеспечено в условиях повышенной концентрации экстракта, многократным сбором фракции по соответствующим пикам на АЖХ хроматограмме, которые далее были подвергнуты ИК-спектральному анализу и установлен их функциональный состав. Состав полиацетиленновых соединений подтвержден также хроматографически по объемам удерживания испытываемых соединений с применением соответствующих эталонов.
Highlights
Известно, что базидиальные грибы являются источниками целого ряда биологически активных веществ: белков, липидов, полисахаридов, органических кислот, ферментов, витаминов, полиацетиленов, которые являются биологически активными продуктами и по сравнению с продуктами химического синтеза менее токсичны и более эффективны [1,2,3]
The analysis demonstrated that the water extract contained 70-80% of polysaccharides, and the ether extract contained 65-70% of polyacetylene compounds
The reversed-phase adsorption chromatography with UV-detection demonstrated that the polyacetylene fraction contained 5 subfractions, which by their chemical nature are related to polyacetylene acids and alcohols conjugated by various combinations of double and triple bonds
Summary
Базидиальные грибы рода Ganoderma lucidum и Pleurotus ostreatus выращивались методом глубинного культивирования в среде, состоящей из пшеничных отрубей на среде Чапека-Докса следующего состава (г/дм3): NaNO3-2, K2HPO4 -1, MgSO4·7H2O-0.5, KCl-0.5, FeSO4·H2O-0.01, глюкоза-30 и H2O. Культивирование проводилось в термостате при 28оС в течение 10 дней. Далее образующуюся биомассу грибов измельчали и экстрагировали метиловым эфиром уксусной кислоты (МЭУК) и водой [8]. Установлено, что в водном экстракте количество ПС достигает до 70-80%, в экстракте МЭУК содержание ПА соединений меняется в пределах 65-70%. Хроматографические исследования проведены на высокоэффективном жидкостном хроматографе фирмы «Kovo» (Чехия). Детекторы: рефрактометр и УФ-спектрофотометр (254 нм), колонки с размером 3.3×150 мм, заполненные сорбентами марки «SeparonSGX» (ЭЖХ) пористостью 100 Å и «Separon-SGX C-18» обращенной фазой (ОФАЖХ), размерами частиц 7 мкм. Молекулярные массы (ММ) и параметры молекулярно-массового распределения (ММР) определены методом ЭЖХ. При этом калибровочную зависимость lgM от VR в эксклюзионном режиме в диапазоне М 1.5×102 -50×102 получили с использованием полисахаридов. Вычисления проведены по методике [9]
Sign-in/Register to view highlights & summary Sign-in/Register to access full text options 
Free) 
Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
Schedule a call
