Abstract
Under experimental model of glycerol-induced rhabdomyolysis in rats new pool of nonheme iron formation in the blood plasma and it’s effect on NO synthesis was studied. On the first day after intramuscular 50% glycerol injection (10 ml/kg) more than 10 times increase of free heme content in plasma and 6 times increase of heme oxygenase activity in the liver was registered. Labile ferric iron pool formation in rhabdomyolysis rat blood plasma, which is completely absent in the samples of the intact group, was proved by EPR analysis. In period from 1st to 6th day of the experiment the contents of this form of iron was greater than 2 mg/L. It is significantly higher than the concentration of transferrin associated iron. During blood labile iron pool formation, an increase of nitrosative stress indicators was observed. On the 4th day, total NO synthase concentration in the liver, as well as S-nitrosothiols and nitrosoprolin in plasma, was 2 times higher than in control. To test the hypothesis about labile iron involvement in nitrosative stress development iron acceptor – unithiol was applied. Unithiol application led to 3 time decrease in blood plasma labile iron concentration on the 4th day of pathology in comparison with animals with experimental rhabdomyolysis. Positive correlation between blood labile iron concentration and nitrosative stress indicators was detected: total NO synthase, nitrosoprolin and S-nitrosothiols concentrations decreased by 1.5 times after blood labile iron concentration lowering. Under glycerol-stimulated rhabdomyolysis development in rat, new pool of nonheme ferric iron is formed in plasma. It is not included in transferrin and therefore is capable for chemical interactions. So we can conclude that labile iron is one of nitrosative stress initiators under rhabdomyolysis. Keywords: iron, transferrin, rhabdomyolysis, unithiol, NO.
Highlights
Тварин розділяли на 7 груп по 6 у кожній: гр
При развитии глицерин-стимулированного рабдомиолиза в плазме крови крыс происходит образование нового пула негемового трехвалентного феррума, которое не включено в трансферрин и потому способно к химическим взаимодействиям
Summary
Дослідження проводили на щурах самцях лінії Wistar масою 180–220 г, раціон харчування яких складався із концентрованого гранульованого комбікорму. Вміст S-нітрозотіолів у плазмі крові та швидкість утворення NO в печінці визначали оригінальними методами in vitro з використанням екзогенної пастки для NO (комплекс діетилдитіокарбамату та двовалентного феруму). До 2 мл плазми крові додавали 0,5 мл розчину діетилдитіокарбомату натрію (ДТК, 100 мкМ) та 0,5 мл розчину ферум сульфату (75 мкМ); після утримання зразків на шутері протягом 20 хв у темряві, протеїни осаджували додаванням 500 мкл насиченого розчину Ba(OH), та 200 мкл 20% розчину ZnSO4; осад протеїнів багатократно відмивали до відсутності залишків нітритів і нітратів у надосадовій рідині; до осаду протеїнів додавали розчин хлоридної кислоти до концентрації 1М; після центрифугування у надосадовій рідині визначали сумарний вміст нітритів і нітратів шляхом відновлення нітратів до нітритів на кадмієвій колонці з їх подальшим визначенням спектрофотометричним методом за допомогою реактиву Грісса [13]. Статистичну обробку результатів проводили у програмі Excel, для оцінки достовірності змін застосували t-критерій Стьюдента
Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
Disclaimer: All third-party content on this website/platform is and will remain the property of their respective owners and is provided on "as is" basis without any warranties, express or implied. Use of third-party content does not indicate any affiliation, sponsorship with or endorsement by them. Any references to third-party content is to identify the corresponding services and shall be considered fair use under The CopyrightLaw.