In a recent contribution we reported on the purification of palmityl-CoA-ACP-transacylase from Mycobacterium smegmatis to electrophoretic and chromatographic homogeneity (Kervabon et al (1977) Biochimie, 59, 23–32). The enzyme shows two forms in monomer-oligomer correlation. We now report that the oligomer of the enzyme has an approximate apparent molecular weight of the order of 780,000. Considering the previous work of this laboratory which led to the estimate of the molecular weight of 100,000 for the monomer (Berset et al (1973) Biochimie, 55, 1381–1394) it is suggested that the oligomer may be an octamer. Results of SDS polyacrylamide gel electrophoresis, with the enzyme either denatured by SDS and reduced with 2-mercaptoethanol, or denatured by guanidine hydrochloride, reduced with 2-mercaptoethanol and alkylated by iodacetic acid, reveal that the monomer itself does not consist of a single polypeptide chain but is formed of two subunits of approximate molecular weight of 47,000 daltons. The substrate specificity of the monomer was studied. It is confirmed that neither the acetyl-CoA, the malonyl-CoA, the caprylyl-CoA nor the docosyl malonyl-CoA can be used as substrate. However, stearyl-CoA is as good a substrate as palmityl-CoA. Thus the enzyme would deserve the name of long-chain acyl-CoA-ACP-transacylase instead of simply palmityl-CoA-ACP-transacylase. On the other hand it is observed that hexadecyl malonyl-CoA is but a poor substrate for the enzyme. Kinetic studies conducted on the monomer of the enzyme indicate that the pH optimum is near 6.2 and reveal some peculiarities. Under the conditions of ACP saturation the dependence of the velocity of the reaction upon palmityl-CoA concentration is apparently michaelian for concentrations well above the cmc of this substrate. However, as the concentration is increased to 40–50 M, an apparent maximum velocity is attained, then an inhibition appears for higher concentrations. The Km value deduced from Lineweaver-Burk plot was 33 × 10−6 moles/liter. Interestingly with palmityl-CoA concentration producing the apparent maximum velocity (50 M) the shape of the curve of velocity versus ACP concentration is sigmoid. A Hill coefficient of n = 1.87 is deduced from the log (v/Vmax-v) versus log [S] plot. It remains to be seen whether this result, which is reminiscent of the presence of two subunits in the monomer reveals or not the cooperative interaction of the ACP molecules with the enzyme. Dans une contribution récente nous avons décrit la purification à l'homogénéité électrophorétique et chromatographique de la palmityl-CoA-ACP-transacylase de Mycobacterium smegmatis [Kervabon et al (1977) Biochimie, 59, 23–32]. Nous montrons maintenant que l'oligomère de l'enzyme a un poids moléculaire apparent approximatif de l'ordre de 780.000. Considérant les travaux précédents de ce laboratoire qui ont conduit à estimer à 100.000 le poids moléculaire du monomère [Berset et al (1973) Biochimie, 55, 1381–1394] on peut suggérer que le polymère est un octamère. Les résultats d'électrophorèse sur gel de polyacrylamide contenant du SDS avec soit l'enzyme dénaturée par le SDS et réduite par le 2-mercaptoéthanol ou dénaturée par le chlorhydrate de guanidine, réduite par le 2-mercaptoéthanol et alkylée avec l'acide iodacétique, révèlent que le monomère luimême ne consiste pas en une seule chaîne polypeptidique mais est formé de deux sous-unités de poids moléculaire de 47.000 daltons. La spécificité du monomère vis-à-vis du substrat a été examinée. Il se confirme que ni l'acétyl-CoA, ni le malonyl-CoA, ni le caprylyl-CoA, ni le docosyl malonyl-CoA ne sont les substrats de l'enzyme. Le stearyl-CoA, néanmoins, est un aussi bon substrat que le palmityl-CoA. Ainsi l'enzyme mérite le nom de (longue chaîne) acyl-CoA-ACP-transacylase au lieu d'être appelée simplement palmityl-CoA-ACP-transacylase. D'un autre côté il est observé que l'hexadecyl malonyl-CoA est un mauvais substrat de l'enzyme. Des études cinétiques conduites sur le monomère de l'enzyme indiquent que l'optimum de pH est près de 6,2 et révèlent quelques particularités. Dans les conditions de saturation en ACP, la dépendance de la vitesse de la réaction de la concentration en palmityl-CoA est apparemment michaelienne pour des concentrations bien au-dessus de la concentration micellaire critique de ce substrat. Néanmoins quand la concentration atteint 40 à 50 M une vitesse maximum apparente est atteinte et puis l'inhibition est observée avec des concentrations plus fortes. La valeur de Km déduite de la représentation de Lineweaver et Burk est de 33 × 10−6 moles/litre. Il est intéressant de noter par ailleurs que dans les conditions de concentration en palmityl-CoA 50 M, suffisante pour donner la vitesse maximum apparente, la courbe de la vitesse en fonction de la concentration de l'ACP est sigmoïde. Un coefficient d'interaction de Hill de 1,87 est déduit de la courbe de log (v/Vmax-v) en fonction de log [S]. Il reste néanmoins à savoir si ce coefficient qui rappelle la présence de deux sousunités dans le monomère, reflète ou non la coopérativité de l'interaction des molécules de l'ACP avec l'enzyme.