Effect of ursolic acid on proliferation of T lymphoma cell lines Hut-78 cells and its mechanism

Abstract

目的探讨乌索酸对T细胞淋巴瘤细胞株Hut-78细胞体外增殖的影响及其作用机制。方法采用MTT法观察不同浓度（10、20、40、80 µmol/L）乌索酸作用不同时间(4、12、24、48、72 h)对Hut-78细胞增殖的抑制作用，并采用流式细胞术分析其早期凋亡的情况。采用免疫印迹法检测乌索酸作用后Hut-78细胞细胞核因子-κB（NF-κB）p65、p50、p52和p100亚基蛋白，以及caspase-8、3、9蛋白表达变化，采用逆转录PCR法检测血管内皮生长因子(VEGF)和环氧合酶-2(COX-2）mRNA表达水平。结果与不加药对照组比较，不同浓度的乌索酸作用组Hut-78细胞的增殖均受抑制（P值均<0.05）；Annexin Ⅴ+/PI−细胞比例均升高（P值均<0.05）；经10、20、40、80 µmol/L乌索酸处理Hut-78细胞72 h后，Hut-78细胞NF-κB p65、p50蛋白和VEGF、COX-2 mRNA表达水平均下降（P值均<0.05），caspase-8、3、9蛋白表达均增加（P值均<0.05）；NF-κB p100、p52蛋白表达差异均无统计学意义（P值均>0.05）。上述作用均呈剂量和（或）时间依赖性（P值均<0.05）。结论乌索酸抑制Hut-78细胞增殖，作用可能与促其凋亡有关，经过死亡受体和线粒体途径完成；影响NF-κB经典信号路径可能是其机制之一，VEGF和COX-2可能也参与其中。