Diseño y obtención de una proteína multiepítopo optimizada para el diagnóstico de la tuberculosis

Abstract

La tuberculosis es una infección crónica del humano y el ganado. Los nuevos métodos de detección se basan en el diseño y uso de nuevas mezclas de proteínas o sus fragmentos para un diagnóstico cada vez más sensible. La inmunoinformática permite analizar y seleccionar las secuencias peptídicas más importantes para el diagnóstico molecular. Las biofábricas de bajo costo para la producción sostenible de nuevos reactivos biológicos, permiten mejorar los rendimientos de producción por una optimización de la secuencia de codones de la transcripción. Así, obtuvimos satisfactoriamente en E. coli BL21 dos versiones de una proteína artificial multiepítopo (16merTB) con 16 epítopos lineales seleccionados a partir de 4 antígenos bacterianos más importantes para el diagnóstico inmunológico de micobacterias del complejo M. tuberculosis, mediante un solo molde de ADN sintético subclonado en dos vectores diferentes de expresión inducible. La proteína soluble purificada, con pesos de 33 o 50 kDa, se obtuvo satisfactoriamente de las fracciones subcelulares a partir de cada cultivo de E. coli utilizado por tipo de vector de expresión y se confirmó mediante electroforesis de proteínas y Western blot con un anticuerpo monoclonal anti-His6x.